PROTAC靶点结合的差异,主要来自细胞内暴露而非E3识别
- 研究在细胞内NanoBRET竞争实验中,以cereblon和VHL示踪剂评估了20个E3配体、连接子和靶点配体各异的PROTAC。
- 按添加浓度计算时表观活性差异很大,被动Caco-2通透性几乎无法解释这种差异。
- 用实测的细胞内游离暴露量校正后,差异明显缩小,并与通透化细胞中的结果吻合。
💡 要点
以后读PROTAC的SAR表,我会先问细胞实际接触到多少药物,再谈E3亲和力。若差异主要来自游离暴露量,看似提高活性的连接子改造可能只是提高了通透性。尽早测量暴露,才不会追错变量。